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      新品推薦

      Turbo

      文字:[大][中][小] 2016-9-22    瀏覽次數:4966    

      Turbo Chemically Competent Cell 產品說明書




      產品規格(CAT#: DL1081)

      Turbo:                                                     100μl/支

      pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

      保存條件(保質期):                            -80℃(6個月) 



      基因型

      F' proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5

       

      產品說明

      Turbo菌株是生長最快的大腸桿菌菌株。平板上6.5小時可見克隆,營養液中搖菌4-6小時可提取質粒,缺失核酸內切酶 (endA),提高了質粒DNA的產量和質量;Turbo菌株可嚴格控制laclq的表達,可以克隆毒性基因;fhuA2突變賦予Turbo菌株對噬菌體T1的抗性;lacZΔM15的存在使Turbo可用于藍、白斑篩選。Turbo感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率>5×108 cfu/μg DNA。

       

      操作方法

      1. Turbo感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)

      并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

      2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

      3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (SOC或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。

      4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的SOC或

      LB培養基上。

      5. 將平板倒置放于37℃培養6.5小時以上。

       

      注意事項

      1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

      2. 混入目的DNA時應輕柔操作。

      3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。





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      Turbo Chemically Competent Cell 產品說明書


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